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Panettiere spielte bereits im haydensextape.com Alter von einem Jahr in Werbefilmen mit und trat insgesamt in ca. 50 solcher Filme auf. Im Alter von vier Jahren erhielt sie eine Rolle in der Fernsehserie Liebe, Lüge, Leidenschaft, die sie bis zum Jahr 1997 behielt. In den Jahren 1996 bis 2000 spielte sie in der Serie Springfield Story eine Nebenrolle. Besonders bekannt wurde sie durch die Rolle der Maddie Harrington, der Tochter von Ally McBeal, in der letzten Staffel der Fernsehserie Ally McBeal. Für die Rolle der Natalie Scheffer im Spielfilm Joe Jedermann wurde sie für einen Young Artist Award nominiert.

Privat engagiert sich Panettiere außerdem für den Tierschutz, so beteiligte sie sich bereits aktiv an mehreren Protestaktionen gegen den Walfang. Dies paparazzi upskirt bilder führte zwischenzeitlich sogar zur Forderung eines Haftbefehls durch japanische Behörden, welche jedoch mittlerweile wieder fallengelassen wurde.^[2]